肝細胞癌(hepatocellularcarcinoma，HCC)是世界上最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，在全球癌癥相關(guān)死亡疾病中發(fā)病率排第5位，死亡率排第3位。目前HCC早期診斷困難，總體療效欠佳，因此，尋求一種新型HCC預警標志物應用于臨床診療變得尤為重要。微小RNA(microRNA，miRNA)是在真核生物中發(fā)現的一類(lèi)內源性非編碼RNA，大小長(cháng)約20～23個(gè)核苷酸。成熟的miRNA結合到與其互補的mRNA位點(diǎn)，通過(guò)翻譯抑制下調特定基因產(chǎn)物或指導mRNA降解來(lái)調控基因的表達。目前已發(fā)現miRNA影響細胞周期、細胞分化及腫瘤侵襲等多種生命活動(dòng)。在HCC中發(fā)現異常表達的miRNA有miR-32、miR-200b/200c/429、miR-182、miR-331-3p等，其中在HCC組織中上調的miR-32，通過(guò)對其靶基因的定向調控，促進(jìn)了HCC的發(fā)生與發(fā)展。

　　1miR-32在癌組織中的表達

　　miR-32在人類(lèi)染色質(zhì)中位于9q31.3，以往研究表明miR-32在骨肉瘤中表達下調，在非小細胞肺癌中也出現了低表達，并且與腫瘤分期以及是否有淋巴結轉移密切相關(guān)。Zhang等發(fā)現，miR-32的過(guò)表達會(huì )抑制胃腫瘤細胞的增殖、轉移和侵襲能力，然而在前列腺癌及結腸癌中同樣呈高表達狀態(tài)的miR-32卻可以促使腫瘤發(fā)生不同程度的進(jìn)展。miR-32是首次在哺乳動(dòng)物中被闡述發(fā)揮抗病毒活性的miRNA。研究表明，miR-32在HCC組織中的表達高于正常肝臟組織，并且在體外細胞實(shí)驗中，HCC細胞株中miR-32含量也較正常肝細胞高。miR-32在不同類(lèi)型的腫瘤當中可能扮演著(zhù)"癌基因"或是"抑癌基因"的角色，而miR-32在HCC中則以"癌基因"的角色影響了HCC的病理與生理過(guò)程。

　　2miR-32對HCC細胞影響的可能機制

　　2.1miR-32對細胞周期的影響

　　在整個(gè)細胞周期中，G1期的啟動(dòng)是細胞周期的關(guān)鍵，細胞周期素D1(CyclinD1)對于細胞正常增殖向惡性增殖轉化方面作用巨大，但其表達在正常細胞中受到了機體嚴格控制。Yan等在HCC相關(guān)實(shí)驗中發(fā)現人第10號染色體缺失的磷酸酶及張力蛋白同源的基因(phosphataseandtensionhomologuedeletedonchromosometen，PTEN)是miR-32的靶基因。PTEN在有絲分裂因子及相關(guān)激素的參與下，使得蛋白激酶B(Akt)下游的GSK3β發(fā)生磷酸化，導致CyclinD1表達下降，而miR-32通過(guò)對PTEN進(jìn)行負向調控，使得上述一系列作用機制發(fā)生反向變化，促進(jìn)細胞G1期的啟動(dòng)，miR-32通過(guò)影響細胞周期誘導HCC細胞的增殖。

　　2.2miR-32對細胞凋亡的影響

　　miR-32可以負向調控PTEN的表達，PTEN通過(guò)其去磷酸化作用、抑制細胞周期、負向調控磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)-Akt信號轉導通路等多種途徑來(lái)誘導細胞凋亡，HCC中PTEN含量的降低會(huì )抑制腫瘤細胞的凋亡，從而使HCC得以進(jìn)展。B細胞轉位基因2(B-celltranslocationgene2，BTG2)是抗增殖基因家族中的一員，在正常組織中廣泛表達并能夠作為瞬時(shí)早期反應蛋白參與細胞的增殖、分化、凋亡、DNA損傷修復以及對腫瘤細胞的抑制等多種病理生理過(guò)程，可被多種因素、多條途徑所激活和調節。BTG2的表達與miR-32的表達呈負相關(guān)，并由此有了miR-32可作為針對BTG2基因實(shí)施分子靶向治療的大膽設想。吳杰等發(fā)現與癌旁組織相比，BTG2mRNA在HCC中表達明顯下調，且BTG2的表達同HCC的分化程度呈正相關(guān)，其表達上調能夠抑制HCC細胞增殖并促進(jìn)凋亡。miR-32通過(guò)對PTEN及BTG2的調控，可以很大程度上影響HCC細胞的凋亡。

　　2.3miR-32對細胞侵襲和轉移的影響

　　在分子生物學(xué)基礎上，包括Ras-絲裂原活化蛋白激酶、細胞膜酪氨酸激酶受體和PI3K-Akt信號轉導通路等都影響著(zhù)腫瘤細胞的血管生成、侵襲和轉移。而PI3K信號則可影響血管內皮生長(cháng)因子(VEGF)生物學(xué)作用的發(fā)揮。miR-32可以使PTEN表達降低，削弱了PTEN對PI3K-Akt途徑的下調作用，使低氧誘導因子-1穩定上升，增強低氧誘導因子-1對VEGF的作用，使得腫瘤細胞分泌VEGF的能力增強。姚曉軍等發(fā)現，PTEN基因在HCC中的表達與VEGF的表達在一定程度上呈負相關(guān)，隨著(zhù)HCC組織中PTEN基因表達缺失的增加，VEGF的表達出現上調。miR-32通過(guò)PTEN介導間接對PI3K-Akt信號通路進(jìn)行調控，影響VEGF的生成，從某種程度上促進(jìn)HCC細胞的侵襲和轉移。

　　3miR-32在HCC診斷與治療中的應用前景

　　miRNA海綿是近年來(lái)開(kāi)發(fā)出的一種長(cháng)期抑制miRNA基因的方法。miRNA海綿是一條mRNA，其3′非翻譯區包含若干個(gè)miRNA靶定位點(diǎn)。miRNA海綿的作用機制主要是利用這些靶定位點(diǎn)在沉默復合體切割位點(diǎn)上的一些錯配，從而使抑制劑mRNA不被降解，而是與沉默復合體穩定結合，使其免受天然mRNA靶點(diǎn)的干擾。Moshiri等研究發(fā)現通過(guò)應用miRNA海綿抑制癌基因miR-221的表達，可誘導HCC細胞凋亡并降低其生存能力，這項研究為今后以miRNA為基礎發(fā)展新型HCC治療策略提供了新的方向，但miRNA海綿治療的安全性及有效性仍需進(jìn)一步探討。

　　4結語(yǔ)

　　miR-32影響了HCC細胞生物學(xué)行為，可能作為一種新型HCC預警分子生物學(xué)標志物用于HCC早期診斷、預測，或可作為HCC的候選分子治療靶標。目前已有部分miRNA在HCC的診斷及治療中被深入研究，其在HCC中的診療作用亦可做進(jìn)一步探索。